通遼市分子診斷試劑原材料應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2024-09-23 01:09:14
通遼市分子診斷試劑原材料應(yīng)用
分子診斷中游主要是分子診斷試劑和儀器兩類產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,國內(nèi)試劑發(fā)展較為迅速,而國產(chǎn)儀器占比相對(duì)較小。 分子診斷試劑盒包括核酸提取試劑盒和核酸檢測(cè)試劑盒,基本已經(jīng)國產(chǎn)化。HBV(乙肝病毒)、HCV(丙肝病毒)、HIV(艾滋病毒)等常見病毒的核酸檢測(cè)試劑國內(nèi)生產(chǎn)廠家數(shù)均遠(yuǎn)大于國外廠家。甲型、乙型、丙型流感等常見疾病的核酸檢測(cè)試劑盒已經(jīng)比較成熟,競(jìng)爭(zhēng)廠家較多,幾乎全部為國產(chǎn)品牌。

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全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位。基因芯片技術(shù)將是熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對(duì)手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測(cè)一個(gè)或幾個(gè)目標(biāo)基因,而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)大量目標(biāo)基因的同時(shí)檢測(cè)。隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對(duì)熒光定量PCR 檢測(cè)產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價(jià)格昂貴等原因,預(yù)計(jì)熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

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化驗(yàn)室診斷方法采用的檢測(cè)依據(jù)有以下幾種:①國家標(biāo)準(zhǔn)以及農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn);②動(dòng)物疫病檢測(cè)的其他規(guī)范:③化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測(cè)方法。不管采用何種方法,都需要考慮化驗(yàn)室自身的條件及樣品類型,如在對(duì)偽狂犬病進(jìn)行診斷時(shí),實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀,沒有基因擴(kuò)增儀,在診斷時(shí)檢測(cè)人員可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行診斷。如果送檢樣品為血清,檢測(cè)人員則可以采用酶聯(lián)吸附試驗(yàn),而不需要采用動(dòng)物接種試驗(yàn)與病毒分離鑒定方法。

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選擇靈敏度高的熱啟動(dòng)Taq酶。一般說,Taq酶的擴(kuò)增效率高,靈敏度就高,但也有不一致的情況。如果要擴(kuò)增的樣本目標(biāo)基因豐度較低,建議對(duì)Taq酶的擴(kuò)增靈敏度進(jìn)行檢測(cè)。常見的檢測(cè)方法是將目標(biāo)基因質(zhì)粒片段進(jìn)行10倍或5倍梯度稀釋,在較低的幾個(gè)稀釋度進(jìn)行PCR檢測(cè),選擇檢測(cè)靈敏度較高的熱啟動(dòng)Taq酶。目前國內(nèi)市場(chǎng)上常用的ABI、Bioline、Biog的擴(kuò)增靈敏度都比較高,但知名品牌T的靈敏度略低,研究者可根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。