無錫市熱啟動Taq酶研發(fā)
發(fā)布時間：2024-11-30 01:05:29
無錫市熱啟動Taq酶研發(fā)
Taq DNA聚合酶具有很高的加工合成特性，在適反應(yīng)溫度時，dNTP的摻入速度為35～100 nt/（s．酶分子），擴(kuò)增長度可達(dá)7.6 kb。在低溫條件下，Taq DNA聚合酶的活性明顯降低，導(dǎo)致此酶在模板內(nèi)局部二級結(jié)構(gòu)區(qū)域的延伸能力受阻或前進(jìn)速率常數(shù)與解離常數(shù)的比值發(fā)生改變。在較高的溫度（95℃以上）時，很少有DNA合成；在體外，DNA在較高溫度時的合成速度受到引物或引物鏈與模板鏈雙鏈結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的限制。由于Taq DNA聚合酶的適反應(yīng)溫度高達(dá)75～80℃，故退火溫度和延伸溫度均可適當(dāng)提高，這限制了非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn)，增加了PCR反應(yīng)的特異性。
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加強(qiáng)技術(shù)指導(dǎo)。中國動物疫病預(yù)防控制中 心要制定國家動物疫病強(qiáng)制免疫技術(shù)指南，組織開展省級免疫技術(shù)師資培訓(xùn)。國家獸醫(yī)參考實驗室、專業(yè)實驗室、區(qū)域?qū)嶒炇液透魇》輨游镆卟☆A(yù)防控制中 心要持續(xù)跟蹤病原變化和流行趨勢，為各地免疫方案的制定、疫苗的選擇和更新提供技術(shù)支撐。各省份要組織做好鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物防疫機(jī)構(gòu)、村級防疫員及社會化服務(wù)組織的免疫技術(shù)培訓(xùn)。疫苗及診斷試劑供應(yīng)企業(yè)要做好培訓(xùn)、技術(shù)服務(wù)等工作。
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動物傳染病的預(yù)防措施:.①加強(qiáng)科:學(xué)的飼養(yǎng)管理，增強(qiáng)機(jī)體抗病能力。②加強(qiáng)檢疫。對引種、畜禽集貿(mào)市場、畜禽屠宰場的動物及動物產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格檢疫。嚴(yán)禁染疫動物及動物產(chǎn)品的流通。對檢疫時發(fā)現(xiàn)的染疫動物及動物產(chǎn)品應(yīng)按國家的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行無害化處理。③預(yù)防消毒。開展經(jīng)常性的消毒，可以有效地殺滅外界環(huán)境中的病原體，從而達(dá)到預(yù)防傳染病發(fā)生的目的。④預(yù)防接種。通過對動物進(jìn)行免疫接種疫苗，增強(qiáng)其對某些疫病的特異性抵抗力，是防止動物疫病發(fā)生的一個很重要的有效措施。⑤藥物預(yù)防。在日糧和飲水中加人適量抗生素或驅(qū)蟲藥，以達(dá)到預(yù)防疾病發(fā)生的目的。
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熱啟動Taq酶的產(chǎn)生：在PCR的反應(yīng)過程中，主要有三個階段：變性、復(fù)性、延伸。Taq DNA聚合酶的復(fù)性溫度是72℃，但其在低溫下也有活性（活性較弱），也能催化引物與模板復(fù)性，只是錯配率高，發(fā)生非特異性復(fù)性機(jī)率大。這樣在未達(dá)到72℃之前，反應(yīng)在Taq酶聚合下不斷擴(kuò)增出非特異性產(chǎn)物，而使實驗失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中，這樣由低溫上升至高溫的過程中，引物錯配和二聚體的形成機(jī)率非常高，Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應(yīng)一開始就在大于70℃下進(jìn)行。當(dāng)溫度較低時，酶活性被封閉，當(dāng)溫度大于一定溫度時酶又開始工作。這樣就避免了在低溫下復(fù)性、延伸的過程，消除引物錯配和二聚體形成，減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性？這就是Hot Start taq酶的作用原理。
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動物檢疫的分類:根據(jù)我國現(xiàn)行的動物檢疫法律規(guī)定，我國動物檢疫分為進(jìn)出境檢疫和國內(nèi).檢疫兩大類。①進(jìn)出境動物檢疫。是指對進(jìn)出我國國境的動物、動物產(chǎn)品，由口岸動植物檢疫機(jī)關(guān)實施的檢疫。具體分為:進(jìn)境動物、動物產(chǎn)品檢疫;出境動物、動物產(chǎn)品檢疫;過境動物、動物產(chǎn)品檢疫;②國內(nèi)檢疫。指對國內(nèi)流動的動物、動物產(chǎn)品所進(jìn)行的檢疫。具體劃分為:產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫、動物產(chǎn)品檢疫。
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動物疫病診斷的主要內(nèi)容有:一是對血、 尿、糞等進(jìn)行臨床常規(guī)化驗;二是從流行病學(xué)角度，調(diào)查研究動物疫病流行情況，主要調(diào)查動物發(fā)病時間及地點、疫病蔓延情況、疫情來源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學(xué)方面，剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體，查看其病理變化，或者取病料進(jìn)行送檢，再進(jìn)一步做病理組織學(xué)方面的診斷;四是從微生物學(xué)角度，檢查、堅定從患病的畜禽病料當(dāng)中分離并且培養(yǎng)出來的病原微生物，或者是進(jìn)行動物接種試驗等，五是從免疫學(xué)角度，對組織或者細(xì)胞的變態(tài)反應(yīng)、細(xì)胞的免疫功能及血清學(xué)反應(yīng)等進(jìn)行診斷。