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通化市熱啟動Taq酶應(yīng)用

發(fā)布時間:2025-03-16 00:58:44
通化市熱啟動Taq酶應(yīng)用

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在動物疫病診斷標準等技術(shù)規(guī)范中,酶聯(lián)免疫吸附試驗對試驗中加底物的反應(yīng)步驟進行規(guī)定,規(guī)定固定的時間,然后加終止液。但是,在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗中,加底物的反應(yīng)步驟需要根據(jù)陰性、陽性對照反應(yīng)情況對反應(yīng)的時間進行調(diào)整。如當陰性與陽性對照的反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)后,實驗人員則可以加終止液。有關(guān)資料規(guī)定的時間可能太長或者太短,這樣會對反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應(yīng)時間較長,樣品則有可能呈現(xiàn)陽性,易導致誤診情況的產(chǎn)生。

通化市熱啟動Taq酶應(yīng)用

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化驗室診斷方法- -般采用的檢測依據(jù)為國家標準、農(nóng)業(yè)標準,其次是有關(guān)動物疫病檢測的其它技術(shù)規(guī)程、規(guī)范等,還可以采用化驗室自行設(shè)定的檢測方法。應(yīng)結(jié)合化驗室條件及樣品類型等因素來選擇合適的方法。例如,化驗室需診斷偽狂犬病,如果沒有基因擴增儀,但有酶標儀,就可以采用酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷,而不必用聚合酶鏈反應(yīng)試驗診斷。使用化驗室自行設(shè)定的檢驗方法要慎重,因為,一該檢驗方法是否正確有待驗證;二如果將來有爭議.上訴法院,會有較大的麻煩。

通化市熱啟動Taq酶應(yīng)用

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熱啟動PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時才發(fā)揮作用的PCR,可提高反應(yīng)的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強的活性。PCR 反應(yīng)的初加熱過程中,樣品溫度上升到70℃之前,在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結(jié)合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。結(jié)果會導致非靶序列的擴增,影響反應(yīng)的特異性。熱啟動可減少非靶序列的擴增,提高反應(yīng)的特異性。在引物設(shè)計時如果某位點因為遺傳元件的定位而受限,如site-directed 突變、表達克隆或用于DNA 工程的遺傳元件的構(gòu)建和操作等情況,熱啟動PCR 尤為有效。

通化市熱啟動Taq酶應(yīng)用

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傳染病流行過程的三:個基本環(huán)節(jié):①傳染源。即傳染來源,就是被感染的動物,包括傳染病病畜禽和帶菌(毒)動物,如潛伏期帶菌(毒)、病愈后帶菌(毒)及健康動物帶菌(毒)等。②傳播方式和途徑。有直接接觸傳播及間接接觸傳播。③易感動物。就是對某種傳染病的病原體有易感性的動物。