烏海市實時熒光定量PCR儀價格
發(fā)布時間:2022-04-08 01:39:32
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熱啟動 Taq 酶的應用:PCR 能夠快速特異的擴增任何已知的 DNA 片段,因此被廣泛的應用于分子生物學的各個領(lǐng)域。Relia 熱啟動酶因具有 5’-3’核酸外切酶活性,可用于熒光定量 PCR 反應。采用熱啟動法擴增是提高 PCR 特異性的常用方法,熱啟動酶是很好的選擇。除此之外,因其具有的高特異性高靈敏度被廣泛應用到各個方面:構(gòu)建 cDNA 文庫,產(chǎn)生大量 DNA 測序,突變體分的析構(gòu)建,基因分離,遺傳病診斷,法醫(yī)鑒定等。

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動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病,即由病原體侵入動物體內(nèi),使動物產(chǎn)生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病,如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病,即由寄生蟲寄生在動物體內(nèi)或體表引起 的疾病,如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據(jù)動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康的危害程度,我國還 將動物疫病分為下列三類:對人畜危害嚴重、需要采取緊急、嚴 厲的強制預防、控制、撲滅措施的為一類疫??;可造成重大經(jīng)濟 損失、需要采取嚴格控制、撲滅措施,防止疫情擴散的為二類疫 ??;常見多發(fā)、可能造成重大經(jīng)濟損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。

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熱啟動酶是耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶,來源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般應用于PCR反應。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴酶,反應體系中須有Mg2+存在,然而保持適當?shù)腗g2+濃度十分重要,因為Mg2+濃度過高或過低均會影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。

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世界各國高度重視分子診斷技術(shù)的發(fā)展,基因芯片將成為新一代分子診斷試劑開發(fā)的主流?;蛐酒欠肿由飳W、微電子、計算機等多學科結(jié)合的結(jié)晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù),被專家譽為“診斷行業(yè)產(chǎn)品”?;蛐酒哂型瑫r能夠檢測多個靶點的功能,具有快速有效的特點。因而基因芯片成為新一代分子診斷試劑的主要開發(fā)方向,但其成本高、開發(fā)難度大,產(chǎn)品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途。基因芯片的大規(guī)模臨床應用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因。

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選擇靈敏度高的熱啟動Taq酶。一般說,Taq酶的擴增效率高,靈敏度就高,但也有不一致的情況。如果要擴增的樣本目標基因豐度較低,建議對Taq酶的擴增靈敏度進行檢測。常見的檢測方法是將目標基因質(zhì)粒片段進行10倍或5倍梯度稀釋,在較低的幾個稀釋度進行PCR檢測,選擇檢測靈敏度較高的熱啟動Taq酶。目前國內(nèi)市場上常用的ABI、Bioline、Biog的擴增靈敏度都比較高,但知名品牌T的靈敏度略低,研究者可根據(jù)自身的實驗要求進行選擇。