遼陽市實時熒光定量PCR儀標準
發(fā)布時間:2022-10-24 01:36:32
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傳染病的有關概念傳染:傳染是在- -定的外界條件下,動物機體與侵入體內(nèi)的病原微生物相互斗爭所表現(xiàn)的不同程度的感受過程。病原微生物在動物機體內(nèi)一定部位定居、繁殖,引起機體產(chǎn)生- - 系列病理反應的過程。呈現(xiàn)出一- 定的臨床癥狀的傳染稱為顯性傳染。反之,如果動物不顯臨床癥狀,稱為隱性傳染。傳染病:凡是由病原微生物引起,具有--定的潛伏期和臨床表現(xiàn),并具有傳染性的疾病稱為傳染病。敗血癥:病原體在機體的局部感染后,不斷繁殖并進人血液,在f血液中繼續(xù)繁殖,產(chǎn)生毒素,引起各實質器官的嚴重病變與全身反應的綜合征。

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分子診斷中游主要是分子診斷試劑和儀器兩類產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,國內(nèi)試劑發(fā)展較為迅速,而國產(chǎn)儀器占比相對較小。 分子診斷試劑盒包括核酸提取試劑盒和核酸檢測試劑盒,基本已經(jīng)國產(chǎn)化。HBV(乙肝病毒)、HCV(丙肝病毒)、HIV(艾滋病毒)等常見病毒的核酸檢測試劑國內(nèi)生產(chǎn)廠家數(shù)均遠大于國外廠家。甲型、乙型、丙型流感等常見疾病的核酸檢測試劑盒已經(jīng)比較成熟,競爭廠家較多,幾乎全部為國產(chǎn)品牌。

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世界各國高度重視分子診斷技術的發(fā)展,基因芯片將成為新一代分子診斷試劑開發(fā)的主流?;蛐酒欠肿由飳W、微電子、計算機等多學科結合的結晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術,被專家譽為“診斷行業(yè)產(chǎn)品”?;蛐酒哂型瑫r能夠檢測多個靶點的功能,具有快速有效的特點。因而基因芯片成為新一代分子診斷試劑的主要開發(fā)方向,但其成本高、開發(fā)難度大,產(chǎn)品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途。基因芯片的大規(guī)模臨床應用還存在尚未克服的技術缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因。

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在PCR反應早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進入指數(shù)期、線性期和終的平臺期,因此可以在PCR反應處于指數(shù)期的某一點 上來檢測PCR產(chǎn)物的量,并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對所檢測樣本進行比較,在real-time Q-PCR反應的指數(shù)期,首先需設定一定熒光信號的域值,一般這個域值(threshold)是以PCR反應的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號 (baseline),熒光域值的缺省設置是3~15個循環(huán)的熒光信號的標準偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真 正的信號,它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)(Ct)。Ct值的含義是:每個反應管內(nèi)的熒光信號達到設定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。研究表明,每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的 對數(shù)存在線性關系,起始拷貝數(shù)越多,Ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標準品可作出標準曲線,因此只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標準曲線上計算出該樣 品的起始拷貝數(shù)。

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傳染病流行過程的三:個基本環(huán)節(jié):①傳染源。即傳染來源,就是被感染的動物,包括傳染病病畜禽和帶菌(毒)動物,如潛伏期帶菌(毒)、病愈后帶菌(毒)及健康動物帶菌(毒)等。②傳播方式和途徑。有直接接觸傳播及間接接觸傳播。③易感動物。就是對某種傳染病的病原體有易感性的動物。