湖州市分子診斷試劑原材料標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)布時(shí)間：2022-11-02 01:36:16
湖州市分子診斷試劑原材料標(biāo)準(zhǔn)
加強(qiáng)技術(shù)指導(dǎo)。中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中 心要制定國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫技術(shù)指南，組織開展省級免疫技術(shù)師資培訓(xùn)。國家獸醫(yī)參考實(shí)驗(yàn)室、專業(yè)實(shí)驗(yàn)室、區(qū)域?qū)嶒?yàn)室和各省份動(dòng)物疫病預(yù)防控制中 心要持續(xù)跟蹤病原變化和流行趨勢，為各地免疫方案的制定、疫苗的選擇和更新提供技術(shù)支撐。各省份要組織做好鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)、村級防疫員及社會(huì)化服務(wù)組織的免疫技術(shù)培訓(xùn)。疫苗及診斷試劑供應(yīng)企業(yè)要做好培訓(xùn)、技術(shù)服務(wù)等工作。
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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶，來源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1，一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴酶，反應(yīng)體系中須有Mg2+存在，然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要，因?yàn)镸g2+濃度過高或過低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。
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動(dòng)物疫病診斷的主要內(nèi)容有:一是對血、 尿、糞等進(jìn)行臨床常規(guī)化驗(yàn);二是從流行病學(xué)角度，調(diào)查研究動(dòng)物疫病流行情況，主要調(diào)查動(dòng)物發(fā)病時(shí)間及地點(diǎn)、疫病蔓延情況、疫情來源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學(xué)方面，剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體，查看其病理變化，或者取病料進(jìn)行送檢，再進(jìn)一步做病理組織學(xué)方面的診斷;四是從微生物學(xué)角度，檢查、堅(jiān)定從患病的畜禽病料當(dāng)中分離并且培養(yǎng)出來的病原微生物，或者是進(jìn)行動(dòng)物接種試驗(yàn)等，五是從免疫學(xué)角度，對組織或者細(xì)胞的變態(tài)反應(yīng)、細(xì)胞的免疫功能及血清學(xué)反應(yīng)等進(jìn)行診斷。
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熱啟動(dòng)通過抑 制一種基本成分延遲DNA合成，直到PCR 儀達(dá)到變性溫度。延緩加入Taq DNA 聚合酶的手工熱啟動(dòng)方法十分煩瑣，尤其是對高通量應(yīng)用。其他熱啟動(dòng)方法使用蠟防護(hù)層將一種基本成分(鎂離子、酶、模板、緩沖液等) 隔離開。在熱循環(huán)時(shí)，蠟熔化把各種成分釋放出來并混在一起。蠟防護(hù)層法同樣比較煩瑣，易于污染，不適用于高通量應(yīng)用。
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熱啟動(dòng)Taq酶產(chǎn)品優(yōu)勢;1. 靈敏度高：可直接擴(kuò)增1個(gè)拷貝的支原體DNA。2. 化學(xué)修飾，無動(dòng)物性DNA污染。3. 性價(jià)比高：相對市面上zui常用的熱啟動(dòng)聚合酶性價(jià)比更高。4. 擴(kuò)增效率高：熒光定量PCR起峰快，Ct值低，擴(kuò)增效率高。5. 可重復(fù)性高：熒光定量PCR擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用：1. 熱啟動(dòng)PCR 2. 熒光定量PCR 3. DNA序列測定4. TA cloning.